男人被口爽还是进去爽,欧美日本国产成人在线,3d欧美精品一区二区,熟妇在线观看一区二区

技術文章您現在的位置:首頁 > 技術文章 > 鼻疽伯克霍爾德菌(BM)核酸檢測試劑盒應遵循的原則
鼻疽伯克霍爾德菌(BM)核酸檢測試劑盒應遵循的原則
更新時間:2020-03-16   點擊次數:1678次

鼻疽伯克霍爾德菌(BM)核酸檢測試劑盒反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數第二個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產生所需要的結果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。

 

化工儀器網

推薦收藏該企業網站
主站蜘蛛池模板: 南阳市| 乌兰察布市| 兰西县| 广宁县| 惠水县| 沙雅县| 聂荣县| 雷波县| 康定县| 当涂县| 木兰县| 綦江县| 五原县| 新兴县| 黔南| 余干县| 衡阳市| 交城县| 宝山区| 新邵县| 郑州市| 图们市| 龙南县| 云霄县| 铜山县| 邢台县| 清涧县| 蒙自县| 化德县| 丹寨县| 图片| 冷水江市| 江阴市| 辽阳县| 寿光市| 湘乡市| 岢岚县| 孝昌县| 灌阳县| 大竹县| 衡阳县|